A tirzepatid egy új, kettős receptor agonista, amely a GIP-et (gyomorgátló peptid) és a GLP-1-et (glükagonszerű peptid-1) is megcélozza, és amelyet az Eli Lilly fejlesztett ki és sikeresen forgalmaz a cukorbetegség, a nem alkoholos steatohepatitis (NASH) és a krónikus testsúly-szabályozás célzott kezelésére, felezési ideje 116 óra. A cukorbetegség kezelésének 2022-es jóváhagyását követően 2023 novemberében további jóváhagyást kapott az Egyesült Államokban a testsúlycsökkentésre. Egy nagyszabású klinikai vizsgálat szerint az ezzel a gyógyszerrel kezelt betegek maximális súlycsökkenést értek el, akár 21%-kal. A molekula egy peptidvázból áll, amely 39 aminosavat és egy oldalláncot tartalmaz a Lys20 aminosavnál. Ebből a 39 aminosavból 37 a természetben előforduló (vagy kódolt), míg kettő nem a természetben előforduló: a nem kódoló amino-izovajsav maradékok a 2. és 13. pozícióban.
A kettős aktivitás elérése érdekében a Tirzepatide nemcsak GLP-1-ből és GIP-ből származó aminosavakat tartalmaz, hanem számos egyedi aminosav-maradékot is felhasznál. Peptidszerkezete elsősorban a GLP-1-ből, GIP-ből, exenatidból és szemaglutidból származik, és néhány maradéka megkülönböztethető.
A Tirzepatide szintézis folyamatának kutatása során számos módszert alkalmaztak szintetikus peptidek előállítására. A megfelelő szintézismódszer kiválasztása jellemzően a molekuláris jellemzők alapján történik, mint például a nem kódoló aminosavak, nem peptid oldalláncok jelenléte és az érintett aminosavak száma.
Bioszintézis：A makromolekulákhoz (például monoklonális antitestekhez) általánosan használt rekombináns technikák kisebb peptidekre is alkalmazhatók. Ebben a megközelítésben külső DNS-t juttatnak be Escherichia coli vagy emlős (kínai hörcsög petefészek, CHO) sejtvonalakba, ahol a peptideket a sejtek szintetizálják. Bár a fejlesztési idő általában hosszabb, mint a hagyományos szintézis módszereké, ezt a megközelítést sikeresen alkalmazták félszintetikus peptidek (például szemaglutid, degludec inzulin és liraglutid) esetében. Ennek az eljárásnak két hátránya a következő: (1) nehézségekbe ütközik a DNS-szekvenciák által nem kódolt aminosavak bevitele; és (2) a poszt-rekombináns szintetikus módosítások szükségessége a nem peptid oldalláncok beépítésére.
ChemicalSszintézis：
A szilárd fázisú peptidszintézis (SPPS) számos közepes méretű peptid esetében hatékonynak bizonyult (pl.Lisinaptid ésExenatid), beleértve a nem kódoló aminosavak felhasználásával szintetizáltakat is. Sajnos a nagyobb peptidek (tipikusan >30 aminosavak) esetében az SPPS gyakran szenved az alacsony folyamathozamtól és gyenge tisztaságtól. Ezen túlmenően, mivel számos, egymást követő egységműveletet hiba nélkül kell végrehajtani (a 30 aminosavat meghaladó peptidek becsült meghibásodási aránya 20%), jelentős termelési kockázatokat hordoz magában.
Folyékony fázisú peptidszintézis (LPPS). Ez a módszer hasonló az SPPS-hez, azzal az eltéréssel, hogy a növekvő peptidek nem kötődnek a gyantához, és C-terminálisaik nem-reaktív amidok vagy védett észterek. Kiválóan alkalmas kisebb peptidek szintézisére (≤10 aminosav), de a hozam és a tisztaság gyorsan csökken a peptid hosszának növekedésével.
Az SPPS/LPPS hibrid módszer. Ez a megközelítés az SPPS-t használja nagy tisztaságú rövid peptidfragmensek és jól jellemzett kicsapás közbenső termékek előállítására, ezáltal elkerülhető számos gyártási kockázat és a hosszabb SPPS-konstrukciókban rejlő tisztasági probléma. Ezt követően a védett fragmenseket folyékony fázisban kapcsoljuk össze.
A két technika előnyeit ötvöző SPPS/LPPS hibrid módszer kiváló megközelítést képvisel. E hibrid stratégia megvalósításához először ki kell választani az LPPS-en keresztül szintetizált megfelelő fragmentumokat. A fragmensszelekció kulcsfontosságú szempontjai közé tartozik a peptid hossza, a fragmentumok teljes száma, az aminosavak azonossága a hasítási helyeken és az oldallánc jellemzői. A töredék mérete és mennyisége kritikus; míg a kisebb töredékek nagy tisztaságot érhetnek el, bonyolultabb gyártási folyamatokat tesznek szükségessé, amelyek további LPPS-lépéseket foglalnak magukban. Ezzel szemben a kevesebb nagy töredék nagyobb termelési kihívást jelent, és nagyobb kockázatot jelent a nagy tisztaság elérésében. E tényezők értékelése után az Eli Lilly kutatói négy fragmentumot választottak ki a tilitropin szintéziséhez. Ami a hasítási helyeket illeti, kulcsfontosságú szempont volt a C-terminális aminosavak diasztereomerizmusa az egyes fragmensekben, mivel az amidváz elősegíti a fragmens diasztereomerizációját.α-sztereocentrum könnyebben, mint az SPPS-konstrukciókban használt Fmoc-védett aminosavak. A különböző töredékek kiterjedt értékelését követően végül négy specifikus fragmentumot választottak ki (2–5). Mind a négy fragmentumot SPPS-en keresztül szintetizálták, szilárd termékként könnyen szétválaszthatók, és kivételesen magas tisztasági szintet érnek el (97,5).–99,5%).
Ezután a 2. töredék–Az 5. ábrát egy négylépéses LPPS eljárással kapcsolják össze.
1. lépés: Kösse össze az első két fragmentumot, a 2-es és a 3-as, amelyek a 30-as aminosavakat képviselik–39 és 22–29, ill. Készítsen külön oldatot a 2. és 3. fragmensből dimetil-szulfoxidban (DMSO) és acetonitrilben (ACN), valamint PyOximban és tiszta diizopropil-etil-aminban ACN-ben, és forgassa össze őket, mielőtt belép a dugós áramlású reaktorba (PFR) 27 az online keveréshez az egyenletesség biztosítása érdekében.；
2. lépés: A kapott aminosavak 22–A 39-es vegyületet (6. vegyület) ezután a 4-es fragmenshez kapcsoltuk, így a 15-ös aminosavakat kaptuk.–39 (7. vegyület)；
3. lépés: A kapott aminosavszekvencia 15–A 39-es vegyületet (7. vegyület) az 5-ös fragmenshez kapcsoltuk, így Boc-védett tildropptidet kaptunk.；
4. lépés: Távolítsa el a védőbevonatot a Tirzepatide előállításához.
A nanoszűrés egy membrán alapú technológia, amely az oldott anyagokat oldatokban választja szét molekulatömeg és hidrofóbitás alapján. A nyers reakcióoldat áthalad a membránon, és eltávolítja az alacsony molekulatömegű szennyeződéseket, például a dibenzofurént (DBF), a dietil-amint (DEA) és a PyOxim-mal rokon melléktermékeket (PyO), miközben megtartja a célpeptideket. A megfelelő pórusméret kiválasztása kritikus fontosságú, mivel egyensúlyra van szükség az alacsony fluxus (túl kicsi pórusok esetén) és a peptidvesztés (túl nagy pórusok esetén) között. Ez a technológia nagyüzemi gyártást tesz lehetővé, jelentősen leegyszerűsített működési eljárásokkal.
Mivel a tirzepatidot tisztán kémiai úton állítják elő, számos gyártó állítja elő gyógyszerészeti hatóanyagát (API), ami intenzív versenyt eredményez. Jelenleg az API a A tirzepatidet a Hequan Pharmaceutical belföldön gyártja, és külföldre exportálja készítménykészítés céljából.
Hivatkozások：Org. Process Res. Dev. 2021, 25, 1628−1636
Lépjen kapcsolatba velünk:
IgényTirzepatidepeptid API fejlesztéshez, referencia szabvány minősítéshez vagy biohasonló programokhoz? A Cosperpharm magas teljesítményt nyújt‑tisztaságú szintetikus vagy rekombinánsTirzepatide teljes HPLC-vel, MS-sel és aminosav-analízissel, valamint stabilitási és szabályozási dokumentációval. A K+F milligrammoktól a kereskedelmi kilogrammokig rugalmas ellátást, átlátható árazást, valamint technikai támogatást kínálunk a szintézishez és a szennyeződések ellenőrzéséhez. Vegye fel velünk a kapcsolatot weboldalunkon vagy e-mailben– 24 órán belül válaszolunk személyre szabott árajánlatokkal és reális átfutási időkkel. Hagyja, hogy a Cosperpharm támogassa Teriparatide projektjét a labortól a piacig.
Telefon: +86-18986204913
Tel: +86-027-83338163
E-mail: info@cosperpharma.com
-
